грамотрицательные аэробы что это значит
Кишечная микрофлора и значение пребиотиков для ее функционирования
Микрофлора кишечника человека является составляющей человеческого организма и выполняет многочисленные жизненно важные функции. Общая численность микроорганизмов, обитающих в различных частях макроорганизма, приблизительно на два порядка превышает числен
У здоровых лиц в кишечнике насчитывается более 500 видов микроорганизмов. Общая масса микрофлоры кишечника составляет от 1 до 3 кг. В разных отделах ЖКТ количество бактерий различно, большинство микроорганизмов локализованы в толстой кишке (около 10 10–12 КОЕ/мл, что составляет 35–50% ее содержимого). Состав кишечной микрофлоры достаточно индивидуален и формируется с первых дней жизни ребенка, приближаясь к показателям взрослого к концу 1-го — 2-му году жизни, претерпевая некоторые изменения в пожилом возрасте (табл. 1). У здоровых детей в толстой кишке обитают представители факультативно-анаэробных бактерий рода Streptococcus, taphylococcus, Lactobacillus, nterobacteriacae, Candida и более чем 80% биоценоза занимают анаэробные бактерии, чаще грамположительные: пропионобактерии, вейлонеллы, эубактерии, анаэробные лактобациллы, пептококки, пептострептококки, а также грамотрицательные бактероиды и фузобактерии.
Вся совокупность микроорганизмов и макроорганизм составляют своеобразный симбиоз, где каждый извлекает выгоды для своего существования и оказывает влияние на партнера. Функции кишечной микрофлоры по отношению к макроорганизму реализуются как локально, так и на системном уровне, при этом различные виды бактерий вносят свой вклад в это влияние. Микрофлора пищеварительного тракта выполняет следующие функции.
Так, бифидобактерии за счет ферментации олиго- и полисахаридов продуцируют молочную кислоту и ацетат, которые обеспечивают бактерицидную среду, секретируют вещества-ингибиторы роста патогенных бактерий, что повышает резистентность организма ребенка к кишечным инфекциям. Модуляции иммунного ответа ребенка бифидобактериями также выражаются в снижении риска развития пищевой аллергии.
Лактобациллы уменьшают активность пероксидазы, оказывая антиоксидантный эффект, обладают противоопухолевой активностью, стимулируют продукцию иммуноглобулина А (IgA), подавляют рост патогенной микрофлоры и стимулируют рост лакто- и бифидофлоры, оказывают противовирусное действие.
Из представителей энтеробактерий наиболее важное значение имеет Escherichia coli M17, которая вырабатывает колицин В, за счет чего подавляет рост шигелл, сальмонелл, клебсиелл, серраций, энтеробактеров и оказывает незначительное влияние на рост стафилококков и грибов. Также кишечная палочка способствуют нормализации микрофлоры после антибактериальной терапии и воспалительных и инфекционных заболеваний.
Кишечные палочки, бифидо- и лактобактерии выполняют витаминообразующую функцию (участвуют в синтезе и всасывании витаминов К, группы В, фолиевой и никотиновой кислот). По способности синтезировать витамины кишечная палочка превосходит все остальные бактерии кишечной микрофлоры, синтезируя тиамин, рибофлавин, никотиновую и пантотеновую кислоты, пиридоксин, биотин, фолиевую кислоту, цианокобаламин и витамин К. Бифидобактерии синтезируют аскорбиновую кислоту, бифидо- и лактобактерии способствуют всасыванию кальция, витамина D, улучшают всасывание железа (благодаря созданию кислой среды).
Процесс пищеварения условно можно разделить на собственное (дистанционное, полостное, аутолитическое и мембранное), осуществляемое ферментами организма, и симбиозное пищеварение, происходящее при содействии микрофлоры. Микрофлора кишечника человека участвует в ферментации нерасщепленных ранее компонентов пищи, главным образом углеводов, таких, как крахмал, олиго- и полисахариды (в том числе и целлюлоза), а также белков и жиров.
Не всосавшиеся в тонкой кишке белки и углеводы в слепой кишке подвергаются более глубокому бактериальному расщеплению — преимущественно кишечной палочкой и анаэробами. Конечные продукты, образующиеся в результате процесса бактериальной ферментации, оказывают различное влияние на состояние здоровья человека. Например, бутират необходим для нормального существования и функционирования колоноцитов, является важным регулятором их пролиферации и дифференцировки, а также всасывания воды, натрия, хлора, кальция и магния. Вместе с другими летучими жирными кислотами он оказывает влияние на моторику толстой кишки, в одних случаях ускоряя ее, в других — замедляя. При расщеплении полисахаридов и гликопротеинов внеклеточными микробными гликозидазами образуются, помимо прочего, моносахариды (глюкоза, галактоза и т. д.), при окислении которых в окружающую среду выделяется в виде тепла не менее 60% их свободной энергии.
Среди важнейших системных функций микрофлоры — поставка субстратов глюконеогенеза, липогенеза, а также участие в метаболизме белков и рециркуляции желчных кислот, стероидов и других макромолекул. Превращение холестерина в не всасывающийся в толстой кишке копростанол и трансформация билирубина в стеркобилин и уробилин возможны только при участии бактерий, находящихся в кишечнике.
Протективная роль сапрофитной флоры реализуется как на местном, так и на системном уровнях. Создавая кислую среду, благодаря образованию органических кислот и снижению рН среды толстой кишки до 5,3–5,8, симбионтная микрофлора защищает человека от колонизации экзогенными патогенными микроорганизмами и подавляет рост уже имеющихся в кишечнике патогенных, гнилостных и газообразующих микроорганизмов. Механизм этого явления заключается в конкуренции микрофлоры за питательные вещества и участки связывания, а также в выработке нормальной микрофлорой определенных ингибирующих рост патогенов субстанций, обладающих бактерицидной и бактериостатической активностью, в том числе антибиотикоподобных. Низкомолекулярные метаболиты сахаролитической микрофлоры, в первую очередь летучие жирные кислоты, лактат и др., обладают заметным бактериостатическим эффектом. Они способны ингибировать рост сальмонелл, дизентерийных шигелл, многих грибов.
Также кишечная микрофлора усиливает местный кишечный иммунологический барьер. Известно, что у стерильных животных в lamina propria определяется очень малое количество лимфоцитов, кроме того, у этих животных наблюдается иммунодефицит. Восстановление нормальной микрофлоры быстро приводит к увеличению количества лимфоцитов в слизистой кишечника и исчезновению иммунодефицита. Сапрофитные бактерии в определенной степени обладают способностью модулировать уровень фагоцитарной активности, снижая его у людей, страдающих аллергией и, наоборот, повышая его у здоровых индивидуумов.
Таким образом, микрофлора ЖКТ не только формирует местный иммунитет, но и играет огромную роль в становлении и развитии иммунной системы ребенка, а также поддерживает ее активность у взрослого. Резидентная флора, особенно некоторые микроорганизмы, обладают достаточно высокими иммуногенными свойствами, что стимулирует развитие лимфоидного аппарата кишечника и местный иммунитет (в первую очередь за счет усиления продукции ключевого звена системы местного иммунитета — секреторного IgA), а также приводит к системному повышению тонуса иммунной системы, с активацией клеточного и гуморального звеньев иммунитета. Системная стимуляция иммунитета — одна из важнейших функций микрофлоры. Известно, что у безмикробных лабораторных животных не только подавлен иммунитет, но и происходит инволюция иммунокомпетентных органов. Поэтому при нарушениях микроэкологии кишечника, дефиците бифидофлоры и лактобацилл, беспрепятственном бактериальном заселении тонкой и толстой кишки возникают условия для снижения не только местной защиты, но и резистентности организма в целом.
Несмотря на достаточную иммуногенность, сапрофитные микроорганизмы не вызывают реакций иммунной системы. Возможно, это происходит потому, что сапрофитная микрофлора является своего рода хранилищем микробных плазмидных и хромосомных генов, обмениваясь генетическим материалом с клетками хозяина. Реализуются внутриклеточные взаимодействия путем эндоцитоза, фагоцитоза и пр. При внутриклеточных взаимодействиях достигается эффект обмена клеточным материалом. В результате представители микрофлоры приобретают рецепторы и другие антигены, присущие хозяину. Это делает их «своими» для иммунной системы макроорганизма. Эпителиальные ткани в результате такого обмена приобретают бактериальные антигены.
Обсуждается вопрос о ключевом участии микрофлоры в обеспечении противовирусной защиты хозяина. Благодаря феномену молекулярной мимикрии и наличию рецепторов, приобретенных от эпителия хозяина, микрофлора становится способной к перехвату и выведению вирусов, обладающих соответствующими лигандами.
Таким образом, наряду с низким рН желудочного сока, двигательной и секреторной активностью тонкой кишки, микрофлора ЖКТ относится к неспецифическим факторам защиты организма.
Важной функцией микрофлоры является синтез ряда витаминов. Человеческий организм получает витамины в основном извне — с пищей растительного или животного происхождения. Поступающие витамины в норме всасываются в тонкой кишке и частично утилизируются кишечной микрофлорой. Микроорганизмы, населяющие кишечник человека и животных, продуцируют и утилизируют многие витамины. Примечательно, что наиболее важную роль для человека в этих процессах играют микробы тонкой кишки, так как продуцируемые ими витамины могут эффективно всасываться и поступать в кровоток, тогда как витамины, синтезирующиеся в толстой кишке, практически не всасываются и для человека оказываются недоступными. Подавление микрофлоры (например, антибиотиками) снижает и синтез витаминов. Наоборот, создание благоприятных для микроорганизмов условий, например при употреблении в пищу достаточного количества пребиотиков, повышает обеспеченность макроорганизма витаминами.
Наиболее изучены в настоящее время аспекты, связанные с синтезом кишечной микрофлорой фолиевой кислоты, витамина В12 и витамина К.
Фолиевая кислота (витамин В9), поступая с продуктами питания, эффективно всасывается в тонкой кишке. Синтезирующийся в толстой кишке представителями нормальной кишечной микрофлоры фолат идет исключительно для ее собственных нужд и не утилизируется макроорганизмом. Тем не менее синтез фолата в толстой кишке может иметь большое значение для нормального состояния ДНК колоноцитов.
Кишечные микроорганизмы, синтезирующие витамин В12, обитают как в толстой, так и в тонкой кишке. Среди этих микроорганизмов наиболее активны в данном аспекте представители Pseudomonas и Klebsiella sp. Однако возможностей микрофлоры для полной компенсации гиповитаминоза В12 оказывается недостаточно.
С содержанием в просвете толстой кишки фолата и кобаламина, полученных с пищей или синтезированных микрофлорой, связана способность эпителия кишечника противостоять процессам канцерогенеза. Предполагается, что одной из причин более высокой частоты опухолей толстой кишки, по сравнению с тонкой, является недостаток цитопротекторных составляющих, большинство из которых всасывается в средних отделах ЖКТ. Среди них — витамин В12 и фолиевая кислота, которые совместно определяют стабильность клеточных ДНК, в частности ДНК клеток эпителия толстой кишки. Даже незначительный дефицит этих витаминов, не вызывающий анемию или другие тяжелые последствия, тем не менее приводит к значимым аберрациям в молекулах ДНК колоноцитов, способным стать основой канцерогенеза. Известно, что недостаточное поступление к колоноцитам витаминов В6, В12 и фолиевой кислоты ассоциируется с повышенной частотой рака толстой кишки в популяции. Дефицит витаминов приводит к нарушению процессов метилирования ДНК, мутациям и, как следствие, раку толстой кишки. Риск толстокишечного канцерогенеза повышается при низком потреблении пищевых волокон и овощей, обеспечивающих нормальное функционирование кишечной микрофлоры, синтезирующей трофические и протективные в отношении толстой кишки факторы.
Витамин К существует в нескольких разновидностях и необходим человеческому организму для синтеза различных кальцийсвязывающих белков. Источником витамина К1, филохинона, являются продукты растительного происхождения, а витамин К2, группа соединений менахинонов, синтезируется в тонкой кишке человека. Микробный синтез витамина К2 стимулируется при недостатке филохинона в диете и вполне способен его компенсировать. В то же время недостаточность витамина К2 при сниженной активности микрофлоры плохо корригируется диетическими мероприятиями. Таким образом, синтетические процессы в кишечнике являются приоритетными для обеспечения макроорганизма этим витамином. Витамин К синтезируется и в толстой кишке, но используется преимущественно для потребностей микрофлоры и колоноцитов.
Кишечная микрофлора принимает участие в детоксикации экзогенных и эндогенных субстратов и метаболитов (аминов, меркаптанов, фенолов, мутагенных стероидов и др.) и, с одной стороны, представляет собой массивный сорбент, выводя из организма токсические продукты с кишечным содержимым, а с другой — утилизирует их в реакциях метаболизма для своих нужд. Помимо этого, представители сапрофитной микрофлоры продуцируют на основе конъюгатов желчных кислот эстрагеноподобные субстанции, оказывающие влияние на дифференцировку и пролиферацию эпителиальных и некоторых других тканей путем изменения экспрессии генов или характера их действия.
Итак, взаимоотношения микро- и макроорганизма носят сложный характер, реализующийся на метаболическом, регуляторном, внутриклеточном и генетическом уровне. Однако нормальное функционирование микрофлоры возможно только при хорошем физиологическом состоянии организма и в первую очередь нормальном питании.
Питание микроорганизмов, населяющих кишечник, обеспечивается за счет нутриентов, поступающих из вышележащих отделов ЖКТ, которые не перевариваются собственными ферментативными системами и не всасываются в тонкой кишке. Эти вещества необходимы для обеспечения энергетических и пластических потребностей микроорганизмов. Способность использовать нутриенты для своей жизнедеятельности зависит от ферментативных систем различных бактерий.
В зависимости от этого условно выделяют бактерии с преимущественно сахаролитической активностью, основным энергетическим субстратом которых являются углеводы (характерно в основном для сапрофитной флоры), с преимущественной протеолитической активностью, использующих белки для энергетических целей (характерно для большинства представителей патогенной и условно-патогенной флоры), и смешанной активностью. Соответственно, преобладание в пище тех или иных нутриентов, нарушение их переваривания будет стимулировать рост различных микроорганизмов.
Углеводные нутриенты особенно необходимы для жизнедеятельности нормальной кишечной микрофлоры. Ранее эти компоненты пищи называли «балластными», предполагая, что они не имеют какого-либо существенного значения для макроорганизма, однако по мере изучения микробного метаболизма стало очевидно их значение не только для роста кишечной микрофлоры, но для здоровья человека в целом. Согласно современному определению, пребиотиками называют частично или полностью не перевариваемые компоненты пищи, которые избирательно стимулируют рост и/или метаболизм одной или нескольких групп микроорганизмов, обитающих в толстой кишке, обеспечивая нормальный состав кишечного микробиоценоза. Свои энергетические потребности микроорганизмы толстой кишки обеспечивают за счет анаэробного субстратного фосфорилирования, ключевым метаболитом которого является пировиноградная кислота (ПВК). ПВК образуется из глюкозы в процессе гликолиза. Далее, в результате восстановления ПВК, образуется от одной до четырех молекул аденозинтрифосфата (АТФ). Последний этап приведенных выше процессов обозначается как брожение, которое может идти различными путями с образованием различных метаболитов.
Гомоферментативное молочное брожение характеризуется преимущественным образованием молочной кислоты (до 90%) и характерно для лактобактерий и стрептококков толстой кишки. Гетероферментативное молочное брожение, при котором образуются и другие метаболиты (в том числе уксусная кислота), присуще бифидобактериям. Спиртовое брожение, ведущее к образованию углекислого газа и этанола, является побочным метаболическим эффектом у некоторых представителей Lactobacillus и Clostridium. Отдельные виды энтеробактерий (E. coli) и клостридий получают энергию в результате муравьинокислого, пропионового, маслянокислого, ацетонобутилового или гомоацетатного видов брожения.
В результате микробного метаболизма в толстой кишке образуются молочная кислота, короткоцепочечные жирные кислоты (С2 — уксусная; С3 — пропионовая; С4 — масляная/изомасляная; С5 — валериановая/изовалериановая; С6 — капроновая/изокапроновая), углекислый газ, водород, вода. Углекислый газ в большой степени преобразуется в ацетат, водород всасывается и выводится через легкие, а органические кислоты (в первую очередь жирные короткоцепочечные) утилизируются макроорганизмом. Нормальная микрофлора толстой кишки, перерабатывая не переваренные в тонкой кишке углеводы, производит короткоцепочечные жирные кислоты с минимальным количеством их изоформ. В то же время при нарушении микробиоценоза и увеличении доли протеолитической микрофлоры указанные жирные кислоты начинают синтезироваться из белков преимущественно в виде изоформ, что отрицательно сказывается на состоянии толстой кишки, с одной стороны, и может быть диагностическим маркером — с другой.
Помимо этого, различные представители сапрофитной флоры имеют свои потребности в определенных нутриентах, объясняющиеся особенностями их метаболизма. Так, бифидобактерии расщепляют моно-, ди-, олиго- и полисахариды, используя их как энергетический и пластический субстрат. При этом они могут ферментировать белки, в том числе и для энергетических целей; не требовательны к поступлению с пищей большинства витаминов, но нуждаются в пантотенатах.
Лактобактерии также используют различные углеводы для энергетических и пластических целей, однако плохо расщепляют белки и жиры, поэтому нуждаются в поступлении извне аминокислот, жирных кислот, а также витаминов.
Энтеробактерии расщепляют углеводы с образованием углекислого газа, водорода и органических кислот. При этом существуют лактозонегативные и лактозопозитивные штаммы. Также они могут утилизировать белки и жиры, поэтому мало нуждаются во внешнем поступлении аминокислот, жирных кислот и большинства витаминов.
Очевидно, что питание сапрофитной микрофлоры и ее нормальное функционирование принципиально зависит от поступления к ней не переваренных углеводов (ди-, олиго- и полисахаридов) для энергетических целей, а также белков, аминокислот, пуринов и пиримидинов, жиров, углеводов, витаминов и минералов — для пластического обмена. Залогом поступления к бактериям необходимых нутриентов является рациональное питание макроорганизма и нормальное течение пищеварительных процессов.
Хотя моносахариды могут легко утилизироваться микроорганизмами толстой кишки, к пребиотикам их не относят.
В нормальных условиях кишечная микрофлора не потребляет моносахариды, которые должны полностью всасываться в тонкой кишке. Пребиотики включают некоторые дисахариды, олигосахариды, полисахариды и достаточно гетерогенную группу соединений, в которой присутствуют и поли- и олигосахариды, которую обозначили как пищевые волокна. Из пребиотиков в женском молоке присутствует лактоза и олигосахариды.
Лактоза (молочный сахар) представляет собой дисахарид, состоящий из галактозы и глюкозы. В норме лактоза расщепляется лактазой тонкой кишки до мономеров, которые практически полностью всасываются в тонкой кишке. Лишь незначительное количество нерасщепленной лактозы у детей первых месяцев жизни попадает в толстую кишку, где утилизируется микрофлорой, обеспечивая ее становление. В то же время дефицит лактазы приводит к избытку лактозы в толстой кишке и значительному нарушению состава кишечной микрофлоры и осмотической диарее.
Лактулоза — дисахарид, состоящий из галактозы и фруктозы, в молоке (женском или коровьем) отсутствует, однако в небольших количествах может образовываться при нагревании молока до температуры кипения. Лактулоза не переваривается ферментами ЖКТ, ферментируется лакто- и бифидобактериями и служит им субстратом для энергетического и пластического обмена, за счет чего способствует их росту и нормализации состава микрофлоры, увеличению объема биомассы в содержимом кишечника, что определяет ее слабительный эффект. Помимо этого, показана антикандидозная активность лактулозы и ее угнетающий эффект на сальмонелл. Полученная синтетическим путем лактулоза (дюфалак) широко используется как эффективное слабительное средство, обладающее пребиотическими свойствами. Как пребиотик детям дюфалак назначается в низких дозах, не оказывающих слабительного эффекта (по 1,5–2,5 мл 2 раза в день в течение 3–6 нед).
Олигосахариды представляют собой линейные полимеры глюкозы и других моносахаров с общей длиной цепи не более 10. По химической структуре выделяют галакто-, фрукто-, фукозил-олигосахариды и др. Концентрация олигосахаридов в женском молоке относительно невелика, не более 12–14 г/л, однако их пребиотический эффект весьма значителен. Именно олигосахариды сегодня рассматриваются как основные пребиотики женского молока, обеспечивающие как становление нормальной микрофлоры кишечника ребенка, так и ее поддержание в дальнейшем. Важным является то обстоятельство, что олигосахариды присутствуют в значимых концентрациях только в женском молоке и отсутствуют, в частности, в коровьем. Следовательно, в состав адаптированных молочных смесей для искусственного вскармливания здоровых детей должны добавляться пребиотики (галакто- и фруктосахариды).
Полисахариды представляют собой длинноцепочечные углеводы в основном растительного происхождения. Инулин, содержащий фруктозу, в больших количествах присутствует в артишоках, клубнях и корнях георгинов и одуванчиков; утилизируется бифидо- и лактобактериями, способствует их росту. Помимо этого, инулин повышает всасывание кальция и влияет на метаболизм липидов, снижая риск развития атеросклероза.
Пищевые волокна — большая гетерогенная группа полисахаридов, наиболее известными из которых являются целлюлоза и гемицеллюлоза. Целлюлоза — неразветвленный полимер глюкозы, а гемицеллюлоза — полимер глюкозы, арабинозы, глюкуроновой кислоты и ее метилового эфира. Помимо функции субстрата для питания лакто- и бифидофлоры и опосредованно поставщика короткоцепочечных жирных кислот для колоноцитов, пищевые волокна оказывают и другие важные эффекты. Они обладают высокой адсорбционной способностью и удерживают воду, что приводит к повышению осмотического давления в полости кишки, увеличению объема фекалий, ускорения пассажа по кишечнику, что обусловливает слабительный эффект.
В средних количествах (1–1,9 г/100 г продукта) пищевые волокна содержатся в моркови, сладком перце, петрушке (в корне и зелени), редьке, репе, тыкве, дыне, черносливе, цитрусовых, бруснике, фасоли, гречневой, перловой крупе, «Геркулесе», ржаном хлебе.
Высокое содержание (2–3 г/100 г продукта) пищевых волокон характерно для чеснока, клюквы, красной и черной смородины, черноплодной рябины, ежевики, овсяной крупы, хлеба из белково-отрубной муки.
Наибольшее же их количество (более 3 г/100 г) содержится в укропе, кураге, клубнике, малине, чае (4,5 г/100 г), овсяной муке (7,7 г/100 г), пшеничных отрубях (8,2 г/100 г), сушеном шиповнике (10 г/100 г), жареном кофе в зернах (12,8 г/100 г), овсяных отрубях (14 г/100 г). Пищевые волокна отсутствуют в рафинированных продуктах.
Несмотря на очевидную значимость пребиотиков для питания микрофлоры, благополучия ЖКТ и всего организма в целом, в современных условиях отмечается дефицит пребиотиков в питании во всех возрастных группах. В частности, взрослый человек должен съедать в сутки примерно 20–35 г пищевых волокон, тогда как в реальных условиях европеец потребляет не более 13 г в сутки. Уменьшение доли естественного вскармливания у детей первого года жизни приводит к недостатку пребиотиков, содержащихся в женском молоке.
Таким образом, пребиотики обеспечивают благополучие микрофлоры толстой кишки, здоровье толстой кишки и являются необходимым фактором здоровья человека в связи с их существенными метаболическими эффектами. Преодоление дефицита пребиотиков в современных условиях связано с обеспечением рационального питания лиц всех возрастных категорий, начиная от новорожденных и кончая людьми преклонного возраста.
Литература
С. В. Бельмер, доктор медицинских наук, профессор
А. В. Малкоч, кандидат медицинских наук
РГМУ, Москва
Посев на микрофлору (идентификация агента и чувствительность к а/б)
Описание исследования
Посев отделяемого верхних дыхательных путей
Тестирование позволяет определить возбудителя инфекции и выбрать для лечения наиболее действенный антибиотик.
Достаточно часто причинами болезней верхних дыхательных путей (в частности, ринита или синусита (поражения носа), фарингита (слизистой оболочки горла)), является воздействие микроорганизмов:
Своевременная постановка диагноза с точным определением агента инфекции способствует проведению адекватного лечения, что в свою очередь, не позволяет перейти заболеванию из острой в хроническую форму.
Цель исследования – выявление микроорганизмов:
основных возбудителей инфекции, условно-патогенных бактерий:
представителей нормальной флоры:
Цель тестирования – выделение следующих возбудителей инфекции:
Посев раневого отделяемого и тканей
Результаты данного тестирования используются для назначения эффективного лечения ран с применением антибиотиков.
Часто сложные раны не лечатся должным образом, причиной чему во многих случаях является неправильное назначение антибиотиков.
Достаточно часто гнойно-воспалительные осложнения ран возникают из-за воздействия условно-патогенных бактерий. Однако еще более частыми возбудителями выступают бактерии, которые не нуждаются для нормальной жизнедеятельности в кислороде (частично или полностью). Общее название таких микроорганизмов – анаэробы. Осложнения ран вызывается некоторыми их представительями – грамотрицательными (неокрашиваемыми при проведении характерной реакции окрашивания по Граму) палочками, грамположительными (окрашиваемыми) кокками, не образующими спор палочками. При проявлении одинаковых симптомов осложнения и идентичности обнаруженных бактерий, реакция их на антибиотики у разных людей может иметь существенные различия.
Действенность лечения антибиотиками на данный момент оставляет желать лучшего. Однако точная идентификация микроорганизмов и определение их чувствительности к антибиотикам позволяет сделать процесс намного действеннее.
Цель исследования – выделение следующих возбудителей инфекции:
Важно. При отборе пробы необходимо иметь наготове транспортную среду.
Посев отделяемого (соскоба) из глаза
Исследование проводится с целью выделения следующих возбудителей:
— золотистого стафилококка (Staphylococcus aureus)
— эпидермиального стафилококка (Staphylococcus epidermidis) и некоторых других видов;
— пневмококков (Streptococcus pneumoniae);
— пиогенного стрептококка (Streptococcus pyogenes);
— стрептококка вириданс (Viridans streptococcus);
— кандиды (Candida) (чаще всего);
— кишечной палочки (Escherichia coli)
— нейссерии (Neisseria species);
— протея (Proteus vulgaris);
Посев отделяемого половых органов или соскоба из влагалища, цервикального канала, мочеиспускательного канала
Тест предназначен для идентификации бактерий, вызвавших неспецифическое инфекционно-воспалительное заболевание (т.е. когда агент инфекции, послуживший причиной его возникновения, не известен), и назначения по его результатам действенного лечения с применением антибиотиков.
В нормальном состоянии биоценоз (совокупность микроорганизмов, представляющих микрофлору) мочеполовой системы человека представлен более-менее постоянным, иногда зависящим от возраста, составом. Так, микрофлора влагалища женщин репродуктивного возраста в значительном количестве содержит строгие (облигатные – гибнущие при попадании в кислородную среду) и факультативные (которые могут существовать как с присутствием кислорода, так и без него) анаэробные организмы, большинство из которых – лактобациллы. В значительно меньшей мере его населяют аэробные (нуждающиеся для жизнедеятельности в нормальном содержании кислорода) и микроаэрофильные (которым достаточно сниженной концентрации кислорода) условно-патогенные бактерии. Во внутреннем канале шейки матки и в самой матке бактерии в нормальном состоянии отсутствуют.
Микрофлора девочек, не вступивших в фазу полового созревания, представлена кокками и дифтероидами (грамположительными палочками).
В ближних к наружному выходу отделах уретры (мочеиспускательного канала) здоровых мужчин могут присутствовать небольшие количества грамположительных палочек и кокков. В проксимальных (удаленных от выхода) отделах уретры, простате и семявыводящих канальцах в норме стерильно.
Если нарушается баланс между видами микроорганизмов и/или появляются несвойственные для данного места бактерии, это создает серьезную предпосылку для возникновения инфекционно-воспалительного процесса.
Болезни, характерные для женщин:
Болезни, часто встречающиеся у мужчин:
Результатом исследования является выделение условно-патогенных бактерий (т.е. тех, которые могут являться частью нормальной микрофлоры, но при ослаблении иммунитета становятся возбудителями заболеваний): энтеробактерий, стрептококков, стафилококков, гемофильных палочек, неферментирующих грамотрицательных бактерий, энтерококков, коринеформных бактерий, дрожжеподобных грибов (только констатируется факт их присутствия, виды не определяются).
Внимание! Исследование наличия специфических возбудителей – хламидий (Chlamydia trachomatis), влагалищной трихомонады (Trichomonas vaginalis), бледной спирохеты (Treponema pallidum), гонококка (Neisseria gonorrhoeae) в рамках данного теста не проводятся.
Посев отделяемого из уха
Данный тест предназначен для микробиологической диагностики гнойно-воспалительных заболеваний уха.
Гнойно-воспалительные процессы отличаются локализацией, их могут вызывать различные возбудители. По расположению очага болезни различают поражение:
Причиной заболеваний выступают следующие микроорганизмы:
Для быстрого выздоровления пациента, а также дл предотвращения перехода болезни из острой формы в хроническую, очень важно идентифицировать возбудитель и определить его чувствительность к антибиотикам.
Посев проводится для проверки наличия грамотрицательных бактерий, относящихся к семейству энтеробактерий (Enterobacteriaceae), синегнойной палочки (Pseudomonas aeruginosa), стафилококков, стрептококков (S. pyogenes, S. pneumoniae, S. viridans), коринебактерий, дрожжеподобных грибов, гемофильной палочки (Haemophilus influenzae).
Посев пункционного материала
Целью посева является выделение следующих возбудителей:
Для исследования отбираются пробы:
Посев на анаэробную микрофлору
Цель исследования – обнаружить присутствие микроорганизмов, живущих и растущих без доступа кислорода, при гнойно-воспалительных процессах.
Анаэробные бактерии благополучно живут в организме человека, составляя значительную часть его микрофлоры. Однако определенные условия могут сделать их причиной гнойных воспалений.
Независимо от того, в какой части тела расположен очаг, действие анаэробов не отличаются разнообразием – это гниение и газообразование. Чаще всего мишенью микроорганизмов становятся органы, в которых они обитают, вследствие чего происходит поражение мочеполовой системы, желудочно-кишечного тракта, верхних дыхательных путей. Проведение точной диагностики является жизненно необходимым – только это поможет назначить адекватное лечение и обезвредить инфекцию, представляющую смертельную опасность для организма человека.
Инфекция возбуждается превотеллами, вейлонеллами, клостридиями, пропионобактериями, эубактериями, пептострептококками, актиномицетами, фузобактериями, гемеллами, бифидобактериями, бактероидами, порфиромонадами.
При обследовании проводится тестирование:
Подготовка к исследованию
Отделяемое (соскоб) верхних дыхательных путей
Отбирать материал рекомендуется до приема пищи и питья, полоскания и прочих лечебных манипуляций или через 2 часа (минимум) после еды и питья. Отбор пробы проводится до начала приема антибиотиков, антисептиков, грибковых препаратов. При назначении специфической антибактериальной химиотерапии материал отбирается до ее проведения или не ранее, чем через сутки после введения препарата.
Для хранения и транспортировки отделяемого верхних дыхательных путей используется стерильный медицинский контейнер. До доставки в лабораторию он должен храниться в холодильнике.
Подписывая контейнер, необходимо указать ФИО, дату рождения, дату отбора пробы и откуда она была взята.
Взятие соскоба с задней стенки глотки или полости носа производится специальным тампоном, который помещается затем в транспортную систему со средой Амиеса (перед отбором пробы из носа необходимо удалить сухие корочки).
Тестирование нужно проводить перед применением противомикробных препаратов. Порция желчи, отобранная при операции, наиболее соответствует требованиям, предъявляемым к качеству биоматериала.
Если есть подозрения, что воспаление спровоцировано Клостридией перфрингенс (Clostridium perfringens), бактероидами Фрагилис (Bacteroides fragilis), пептострептококками (Peptostreptococcus sp), то рекомендуется посев на анаэробную микрофлору с определением чувствительности возбудителей к антибиотикам.
Посев раневого отделяемого и тканей
Обследование проводится до начала лечения антибиотиками.
Если у пациента рана от укуса, глубокая угревая сыпь, паронихия (воспаление околоногтевого валика), некротический фасциит (поражение бактериями соединительной оболочки – фасции и подкожной клетчатки), пролежни, газовая гангрена, то перед данным тестированием рекомендуется провести предварительные обследования: посев на анаэробы (бактерии, полностью или частично не нуждающиеся в кислороде) и бактериоскопия мазка на стекле.
При проведении обследования необходимо выполнять следующие требования:
Посев отделяемого (соскоба) из глаза
Отбор отделяемого для исследования производит лечащий врач или сам пациент. Обследование назначается до приема антибиотиков.
Соскоб отбирается с конъюнктивы глаза, с переходной складки при вывернутом верхнем или нижнем веке. Для этого используется специальный тампон, который после отбора пробы помещается в емкость с транспортной средой. При проведении специфической антибактериальной химиотерапии проба отбирается до ее начала или через сутки после введения препарата.
В рамках данного теста не исследуется наличие вирусов и хламидий.
Посев отделяемого половых органов
Проведение обследования на фоне приема антибиотиков не информативно. Материал отбирается до его начала или через полторы-две недели после окончания лечения антибактериальными препаратами или иммуномодуляторами.
Нецелесообразно проводить обследование женщин во время менструации, так как количество микроорганизмов в этот период значительно меньшее, чем обычно. Биоматериал отбирается, начиная с 5-7 дня от начала цикла.
Перед проведением тестирования:
Обследование не проводится после инструментального, мануального, ультразвукового исследований, физиопроцедур, кольпоскопии и прочих манипуляций.
У мужчин исследуется эякулят (сперма). Биоматериал собирается в контейнер с крышкой. Для сбора эякулята не используются:
Это объясняется тем, что вещества, в них присутствующие (используемые при производстве презервативов или оставшиеся в контейнере после дезинфекции) могут повлиять на результат обследования.
До доставки в лабораторию, контейнер с образцом хранится в холодильнике при температуре от +2 до +8⁰С, но не более 10-12 часов. Охлажденный эякулят должен быть доставлен для исследования в день сбора (в качестве «холодильника» при транспортировке может быть использован термос с небольшим количеством льда или пакет с охлаждающими элементами).
Соскоб из мочевого канала (уретры) обирается через 1,5-2 часа после мочеиспускания или перед ним. Отбор пробы рекомендуется проводить до начала специфической антибактериальной химиотерапии или не менее чем через сутки после последнего введения лекарственного средства.
Посев отделяемого из уха; посев пункционного материала
Исследование не целесообразно проводить на фоне лечения антибиотиками, применения антисептиков и противогрибковых средств.
Материал для посева собирается только в стерильные контейнеры.
Транспортные среды перед использованием хранятся в холодильнике. Они подогреваются до комнатной температуры за полчаса до применения. Для каждого вида исследования предназначена особая транспортная среда.
Контейнер (или пробирка) с биоматериалом обязательно подписывается. Необходимо указать фамилию и инициалы пациента, дату рождения, дату, время сбора материала, и откуда взята проба.
Хранение отобранного материала должно производиться согласно требованиям, предъявляемым к режиму и срокам.
Посев на анаэробную микрофлору
Обследование не рекомендуется проводить на фоне антибактериальной терапии.
Посев на аэробные микроорганизмы целесообразно проводить параллельно с посевами на микрофлору в условиях отсутствия кислорода и проведением микроскопического исследования мазка, сделанного отдельным стерильным тампоном на стекле. На бланке направления обязательно делается запись, если исследование предназначено для выявления клостридий (бактерий, живущих и растущих только при отсутствии кислорода) и актиномицетов (микроорганизмов, соединяющих в себе признаки грибов и бактерий).
Показания к исследованию
Посев отделяемого верхних дыхательных путей
Посев раневого отделяемого и тканей
Посев отделяемого (соскоба) из глаза
Тестирование назначается при наличии гнойно-воспалительных заболеваний глаз:
Особую группу риска составляют лица, пользующиеся контактными линзами.
Посев отделяемого половых органов (соскоб)
Посев отделяемого из уха
Показанием к проведению теста является наличие гнойных и негнойных отитов (воспаления уха).
Посев пункционного материала
Тестирование назначается при наличии гнойно-воспалительных заболеваний:
Посев на анаэробную микрофлору
Тестирование рекомендуется проводить:
Интерпретация исследования
Посев отделяемого верхних дыхательных путей
Результат обследования выдается на бланке лаборатории. Пациент получает следующую информацию:
В зависимости от вида обнаруженных возбудителей предлагается перечень противомикробных средств.
Если в результате посева дала рост в незначительном количестве нормальная, условно-патогенная или сопутствующая флора, то исследование на чувствительность к антибиотикам не проводится.
Данные, предоставляемые пациенту после обследования, содержат следующую информацию:
Выбор антимикробных средств производится в зависимости от идентифицированных бактерий.
Данное обследование не предназначено для определения вида грибов и их чувствительности к антигрибковым препаратам. Если возникает подозрение на грибковую инфекцию, проводится отдельное тестирование (посев на дрожжеподобные грибы).
Норма – желчь стерильна.
При отборе пробы методом дуоденального зондирования не исключено попадание в пробу сапрофитной микрофлоры (т.е. питающейся мертвой, разлагающейся органикой) рта и верхних отделов пищеварительного тракта (глотки, пищевода, желудка).
Если после посева в незначительном количестве дала рост нормальная, условно-патогенная или сопутствующая флора, то исследование на чувствительность к антибиотикам не проводится.
Посев раневого отделяемого и тканей
После проведения исследования пациент получает следующую информацию:
Противомикробные препараты подбираются в зависимости от вида обнаруженных возбудителей.
Попадание в посев микроорганизмов с кожи может вызвать незначительный рост сапрофитных бактерий.
При наличии заболевания происходит значительный рост бактерий, являющихся его причиной. Высокий титр позволяет диагностировать инфекцию. Количество колоний в таком случае превышает 10 000 КОЕ/тампон.
Если обнаружен рост сопутствующей, нормальной или условно-патогенной микрофлоры в количестве, не способном вызвать заболевание, то исследование на чувствительность к антибиотикам не проводится.
Посев отделяемого (соскоба) из глаза
После исследования предоставляются следующая информация:
Выбор антимикробных препаратов, рекомендуемых для проведения лечения, осуществляется исходя из вида выделенных бактерий.
Если есть вероятность грибковой инфекции, то проводится отдельный тест – «Посев на дрожжеподобные грибы».
Результаты интерпретируются следующим образом:
Посев отделяемого половых органов (соскоб)
Информация, предоставляемая после исследования:
Определение антимикробных препаратов осуществляется исходя из вида выделенных бактерий.
Результаты интерпретируются следующим образом:
При выявлении стрептококков Streptococcus agalactiae и Streptococcus pyogenes, являющихся патогенными (вызывающими заболевание), обязательно определяется чувствительность к антибиотикам независимо от количества колоний в единице объема.
Если обнаружен рост сопутствующей, нормальной или условно-патогенной микрофлоры в количестве, не способном вызвать заболевание, то исследование на чувствительность к антибиотикам не проводится.
Посев отделяемого из уха
После проведения исследования пациент получает следующую информацию:
Антимикробные препараты назначаются в зависимости от вида обнаруженных возбудителей.
Нормой является отсутствие роста.
Данный тест не предусматривает определение вида грибов и их чувствительности к противогрибковым препаратам.
Если в посев попали микроорганизмы с кожи, то происходит незначительный рост сапрофитных или условно-патогенных бактерий.
Если имеет место заболевание, то происходит рост бактерий, его вызывающих. Количество колоний в таком случае превышает 100 000 кое.
Если в наличие явные признаки заболевания, а рост при посеве отсутствует, целесообразно повторить отбор материала, т.к. он мог быть собран неправильно или на фоне применения антибиотиков.
Если обнаружен рост сопутствующей, нормальной или условно-патогенной микрофлоры в количестве, не способном вызвать заболевание, то исследование на чувствительность к антибиотикам не проводится.
Посев пункционного материала
После проведения исследования пациенту выдается следующая информация:
Выбор антимикробных препаратов осуществляется в зависимости от вида выявленных микроорганизмов.
Норма – рост отсутствует.
Если в посеве обнаружено присутствие представителей другой микрофлоры, попавших туда случайно из воздуха, с поверхности кожи или каким-то другим образом, об этом тоже сообщается в описании результатов.
В рамках теста не определяется вид грибов и их чувствительность к противогрибковым препаратам.
Если обнаружен рост сопутствующей, нормальной или условно-патогенной микрофлоры в количестве, не способном вызвать заболевание, то исследование на чувствительность к антибиотикам не проводится.
Посев на анаэробную микрофлору
Результат исследования включает в себя информацию о наличии или отсутствии роста бактерий. Положительный ответ подразумевает дополнительное определение чувствительности к антибиотикам.
Норма: рост при посеве отсутствует.
Результат теста выдается на бланке лаборатории медицинской компании «Наука». Пример по данному анализу представлен ниже:
Ф.И.О.: Иванов Сидор Петрович Пол: м Дата рождения: хх.хх.хххх
Дата исследования: хх.хх.хххх
Исследование
Результат
Нормы интерпретации
Примечание
[411] Посев на микрофлору (идентификация агента и чувствительность к аб)